人結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶；SW480/LUC

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；Sw480-LUC；人結(jié)腸癌細(xì)胞株-LUC;人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

種屬來源；人

組織來源；結(jié)腸

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；p3-p8

特別注意；SW480-LUC細(xì)胞培養(yǎng)不能通入CO2，如果沒有條件準(zhǔn)備空氣氣相的培養(yǎng)箱，可以采用不透氣密封蓋的T25培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中每天將細(xì)胞拿出培養(yǎng)箱換1-2次空氣

背景介紹；Luciferase SW480細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持。

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)重組蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)

CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白

BDNF重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein

CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

VIP重組人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein

BDNF重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein

彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)重組蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)

VIP重組人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein

CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白

CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble adenylate cyclase (sAC) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)檢測試劑盒

HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISAKit 人纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3ELISAKit大鼠25羥基3

飲料果膠生物酶比色法定量檢測試劑盒20次

Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶；SW480/LUC心肌鈣蛋白 (c)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

CXCL8(CXCL-8)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

結(jié)蛋白 (Desmin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

雌三醇 (E3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)檢測試劑盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit

Porcine ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)檢測試劑盒

侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIGF/CXCL9(Humanmonocyteierferongammainducingfactor)ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子

體液賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitMHC/BoLA牛主要組織相容性復(fù)合體

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。