NCM 460人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

細(xì)胞別稱： NCM460

種屬來源： 人

組織來源： 結(jié)腸

生長(zhǎng)特性： 貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)： 上皮細(xì)胞樣

生物安全等級(jí)： 1

細(xì)胞規(guī)格： 1 × 106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)： 無

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1642 BCRC; 60050 BCRJ; 0145 ECACC; 90020104

培養(yǎng)基： RPMI-1640＋ 10% FBS＋ 1% P/S

培養(yǎng)條件： 95%空氣+5%CO2 ，溫度：  37℃

凍存條件： 60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基：+30%FBS+10%DM

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)

CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein

CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein

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鴨白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai bactericidal permeability increasing protein aibody (BPI-Ab) ELISA Kit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)檢測(cè)試劑盒

HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 人血管活性腸肽(VIP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACO-2(Humanaconitase2)ELISAKit人烏頭酸酶2

煙草葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒5次

Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

NCM 460人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞氧化酶（XOD）測(cè)試盒（比色法）

植物二(MDA)測(cè)定試劑盒(比色法)

（VitaminE）測(cè)定試劑盒（比色法）

超微量Na+K+–ATP酶測(cè)定試劑盒

大鼠胱抑素S(CST4)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： CST4 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E(Apo-E)檢測(cè)試劑盒

乙型流感病毒(IBV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-5(Humanmaixmetalloproteinase5)ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶5

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitVK1犬K1