細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

COLO 679人黑素瘤細胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源: 人

年齡性別： 47 歲，女性

組織來源: 皮膚

生長特性： 貼壁生長

細胞形態(tài): 上皮細胞樣

細胞規(guī)格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 凍存管

培養(yǎng)條件: RPMI 1640+10% Foetal Bovine Serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件: 90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cailage glycoprotein 39 (HC gp-39) ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)檢測試劑盒

Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 人殺傷細胞凝集素樣受體(KLR)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG檢測試劑盒人抗巨細胞病毒抗體IgG(ai-CMVIgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/酚)50次

Humanα1-Aiypsin,α1-ATELISAKit人α1抗(α1-AT)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

COLO 679人黑素瘤細胞小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠單胺氧化酶A（MAOA）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠大內(nèi)皮素(BigET)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠催乳素(PRL)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠載脂蛋白H(APOH)檢測試劑盒 ，英文名： APOH ELISA Kit

Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細胞因子檢測試劑盒

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 小鼠白介素-5(IL-5)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanfrizzledhomolog8,FZD8ELISAKit人卷曲蛋白8

細胞/組織白蛋白載玻片制備試劑盒20次

ELISAKitTIMP-2大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2