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小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

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小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存 詳細(xì)資料

小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱:小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱: MBP ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

FANCA    重組人 FANCA / FACA 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FANCA
PCNA    重組人 PCNA 蛋白 (His 標(biāo)簽)    PCNA
ANXA5    重組人 ANXA5 / Annexin Ⅴ / Annexin A5 蛋白    ANXA5
F3    重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD42 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    F3
IL2RG    重組人 IL2RG / CD32 蛋白 (His 標(biāo)簽)    IL2RG
IGFBP7    重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 標(biāo)簽)    IGFBP7
S00B    重組人 S00B 蛋白 (His 標(biāo)簽)    S00B
F3    重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD42 蛋白 (His 標(biāo)簽)    F3
RRM2B    重組人 RRM2B / P53R2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    RRM2B
RGMA    重組人 RGMA 蛋白 (His 標(biāo)簽)    RGMA
OTUB2    重組人 OTUB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    OTUB2
HIST3H2A    重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白    HIST3H2A
BLVRB    重組人 BLVRB / biliverdin reductase B 蛋白 (His 標(biāo)簽)    BLVRB
TCLA    重組人 TCLA 蛋白 (His 標(biāo)簽)    TCLA7-023-00    000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯 )    00 支
葡聚糖 T-0    0g    
半干法電轉(zhuǎn)液 ( 干粉 )    20L    
SP60025(JNK 抑制劑 )    5mg    
PCR LIC 克隆套裝    μg    
23-0760-2    Superoxide dismutase( 抗氧化酶 )    2mg
60802B-50    柱式細(xì)菌 DNAout( 含 )    50 次
RNase-free 氯化鋰溶液 ,0M    00mL    
超敏型 BCA 法蛋白定量試劑盒    500 次    
通用洗柱液    00mL    
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存L- ( 還原型 )    5g 
8-030-50    丙二醛測試盒 / 脂質(zhì)過氧化物測試盒    50 T
020-0    DNA  DTT( 二硫代蘇糖醇 )    0g
Stb4 菌種    mL    
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)(50-400 bp)    50 次    
一步法大提質(zhì)粒 DNAout    5次    
RosettaBlue(DE3) 菌種    mL    
3090-500    Long-Taq DNA 聚合酶    500U
20668N-    5mL DNA 離心超濾管 (50-250 KD)    個

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