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小鼠GTP酶 KRas 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

小鼠GTP酶 KRas 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

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小鼠GTP酶 KRas 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存 詳細(xì)資料

小鼠GTP酶 KRas 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱:
英文名稱:Mouse GTPase KRas ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T    小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA Kit,48T/96T     *
人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human Interferon ω,IFN-ω ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    人泛素蛋白(Ub)ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T    人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA Kit,48T/96T     *
人(KLK )ELISA試劑盒     英文名稱:    Human Kallikrein ,KLK ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T    小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL3)ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
人膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human urinary bladder cancer antigen,UBC ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    牛的牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA Kit,48T/96T     *
人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒     英文名稱:    Human anti-fibrillarin antibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T    人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human anti-filaggrin antibody,AFA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA Kit,48T/96T     *
人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    人血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白(TSP-)ELISA Kit,48T/96T    進(jìn)口/原裝AG5  BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體     0.2ml        
DCP  異常原/脫-γ-羧基原抗體     0.2ml        
phospho-E2F (Ser337)  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-抗體     0.ml        
ENO  MYC啟動子結(jié)合蛋白抗體     0.2ml        
Eukaryotic aspartyl protease  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體     ml        
FGFR3/CD333  成纖維細(xì)胞生長因子受體3抗體     0.ml        
SPTLC  棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶抗體     0.2ml    BORIS/CT27  腫瘤/睪抗原27抗體(高遷移率族蛋白)     0.2ml
AD7C-NTP  神經(jīng)絲蛋白抗體     0.2ml    GLUT3  葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗體     0.ml
BKCA alpha  鈣激活鉀通道蛋白α抗體     0.2ml    HN Hemagglutinin /HA probe  甲型流感病毒血凝素抗體     0.2ml
phospho-ADRB2(Ser346)  磷酸化腎上腺素能受體β2抗體     0.ml    Acetyl-Histone H3(K8)  乙?;M蛋白H3抗體     0.2ml
Tomoregulin-  腦腫瘤抑癌蛋白抗體     0.2ml    Phospho-HSL (Ser660)  磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體     0.ml

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