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小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

Mouse EyePrimaCell: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells

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     小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道。其中,視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性,并分泌多種生長(zhǎng)因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的視網(wǎng)膜組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的視網(wǎng)膜組織能使得視網(wǎng)膜組織中色素上皮細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變,從而將色素上皮細(xì)胞分離開來。。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養(yǎng)的上皮原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞。

本試劑盒包含: ()OptiTDSTM小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞組織解離液(3×ml) (2)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞組織處理緩沖液(00ml) (3)FibrOutTM小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞成纖維抑制劑(ml(500X)) (4)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織洗液(5 x 00 ml) (5)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(ml500X)及血清(5x0ml) (6)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) (7)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織預(yù)備液( x 00 ml) (8)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟:
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida

小鼠垂體瘤細(xì)胞英文名稱:

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis

His標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug

中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺氟耐藥英文名稱:

人腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書7-氟-2-甲喹啉分子式:6.8英文名稱:7- -2- methyl group:28-74-分子量: C0H8FN

鹽酸吖分子式:5.56英文名稱:Acridine hydrochloride:7784-47-3分子量: C3H9N·HCl

5-溴-2-甲-3-硝吡分子式:27.02英文名稱:5- -2- -3- nitro pyridine:9434-05-4分子量: C6H5BrN2O2

2-溴-3-氯-5-三氟甲吡分子式:260.44英文名稱:2- -3- three f:75806-84-7分子量: C6H2BrClF3N

聚乙英文名稱:PE分子式:分子量: [C2H4]n:9002-88-4

糖精鈉英文名稱:Saccharin sodium分子式:205.7分子量: C7H4NNaO3S·xH2O:82385-42-0

3-氯--丙英文名稱:3- --分子式:94.54分子量: C3H7ClO:627-30-5

小白菊內(nèi)酯英文名稱:White Chrysanthemum分子式:248.32分子量:C5H20O3:20554-84-

2-溴嘧分子式:58.98英文名稱:2- bromide:4595-60-2分子量: C4H3BrN2

4,4'-二甲聯(lián)甲酰分子式:英文名稱:4,4'- two methyl group:分子量:

注意事項(xiàng):
. 接收到小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

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