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人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng)

人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng)

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人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng) 詳細資料

注意事項:
. 接收到人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng),肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

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人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng)

Human Uterine: Normal Uterine Endometrial Epithelial Cell Derivatives

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人子宮內膜上皮細胞提取物【Human Uterine: Normal Uterine Endometrial Epithelial Cell Derivatives】
     人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng)人子宮內膜上皮細胞提取物是從人子宮內膜上皮細胞提取的,人子宮內膜上皮細胞從正常人子宮組織制備。正常人子宮組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。        cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mgRNA68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。        蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。        潛在的應用: <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。?

Oct4 抗體, 鼠單抗 FCM    50 µg

Progesterone receptor / PGR 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P   IF  ICC/IF    50 µg

RBP4 抗體, 鼠單抗 ELISA   IHC-P    50 µg

MKK6 / MEK6 / MAP2K6 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

FABP2 / I-FABP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

CD3D & CD3E 抗體, 兔單抗 ELISA   IHC-P    50 µg

CD66 / ALCAM 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

BCL2L / Bim 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Ki67 / MKI67 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB    50 µg

DSG2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IP   50 µg

人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng)2,6-二甲吡分子式:07.2英文名稱:2,6- two methyl pyridine:08-48-5分子量: C7H9N; NC(CH3)CHCHCHC(CH3)

4-氯-6-氟-2-甲喹啉分子式:95.62英文名稱:4- -6- -2- methyl group:8529-0-6分子量: C0H7ClFN

檸檬酸鉀分子式:324.4英文名稱:Potassium citrate:7778-49-6分子量: K3C6H5O7

4-氟-3-硝砜分子式:344.24英文名稱:4- -3- nitrobenzene:32-30-分子量: C2H6F2N2O6S

3-胺聯分子式:245.33英文名稱:3- aniline group:98275-79-5分子量: C8H5N

2-溴-3-氟三氟甲分子式:243英文名稱:2- -3- three f:04540-42-3分子量: C7H3BrF4

9-(3-溴)咔唑分子式:322.2英文名稱:9- (3- Bromophenyl) carbazole:852-6-2分子量: C8H2BrN

4-氯靛紅英文名稱:4- isatin chloride分子式:8.58分子量: C8H4ClNO2:623263

木蘭脂素英文名稱:Magnolia fat分子式:46.46分子量:C23H28O7:3008-8-

2,5-二醛--甲氧-4-(2-乙己氧)分子式:292.37英文名稱:2,5- two, --, 2-, -4-, and benzene:20325-22-3分子量: C7H24O4

培養(yǎng)步驟:
人子宮內膜上皮細胞提取物培養(yǎng)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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