細胞處理：

1） 凍存細胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

Daoy (人髓母細胞瘤細胞)

商品屬性

商品介紹

別稱 DAOY; D324 Med; D-324 Med; D324 MED; D-324MED; D324

種屬 人類

年齡（性別） 男性，4歲

組織來源 結(jié)締組織增生性小腦髓母細胞

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

參考資料(來源文獻)

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 MEM＋10% FBS＋1%P/S

推薦傳代比例 1:3-1:6

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~33.6小時 (PubMed=2993532); 34小時 (ATCC)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice (The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠亮酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測試劑盒 ，英文名： LRG1 ELISA Kit

Monkey ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit白介素8(IL-8/CXCL8)檢測試劑盒

Ratβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGAL(Humangalanin)ELISAKit人甘肽/甘素

細胞3C類蛋白酶(SARS-CoV3C-likePROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒20次

Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit大鼠前列腺特異性抗原(PSA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

ASGR1重組小鼠 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 Protein

C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase 0.5mgC-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase) c-mer原癌基因酪激酶抗原

YWHAQ重組人 14-3-3 tau / 14-3-3 theta / YWHAQ 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白

CD86 Protein Mouse 重組小鼠 CD86 / B7-2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase 0.5mgC-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase) c-mer原癌基因酪激酶抗原

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白

ASGR1重組小鼠 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 Protein

CD86 Protein Mouse 重組小鼠 CD86 / B7-2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

YWHAQ重組人 14-3-3 tau / 14-3-3 theta / YWHAQ 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

Daoy (人髓母細胞瘤細胞)豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒 96T/48T

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HumanCrosslaps,Cr檢測試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織DYRK1A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

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